Uracil-DNA-Glykosilase (UDG) sorgt zusammen mit dUTP für die Vermeidung von Kontaminationen in PCR-Reaktionsansätzen

Uracil-DNA Glycosylase (UDG):  Anfrage/Bestellung per E-mail                        HC=high concentrated
Uracil-DNA Glycosylase (UDG): Datenblatt
Uracil-DNA Glycosylase (UDG): English description

Features:
Durch die Verwendung von dUTP anstelle von dTTP werden die entstandenen DNA-Fragmente für eine Hydrolyse durch UDG sensibilisiert. Eine weitere, PCR-Amplifikationen vorgeschaltete, Inkubation der Ansätze mit UDG und eine zusätzliche Hitzedenaturierung zerstören die in früheren PCR-Reaktionen entstandenen, uracilhaltigen PCR-Fragmente, die in den neuen Reaktionsansatz verschleppt worden sein könnten.

Anwendung:
Inkubation von 1 unit Uracil-DNA-Glycosylase mit bis zu 0.1 μg uracilhaltiger DNA für 10 Minuten bei 37 °C. Hitzeinaktivierung des Enzyms für 10 Minuten bei 95 °C.

Hinweis: Bei Temperaturen unter 55 °C wird die Aktivität der Uracil-DNA-Glycosylase teilweise wiederhergestellt.

Konzentration HC: 
>20 units/μl gelöst in 20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM NaCl, 1 mM EDTA und 50 % Glyzerin.

Reaktionspuffer (10X):
200 mM Tris-HCl (pH 8.0 at 25°C), 10 mM EDTA, 10 mM DTT. Inkubation von 1X buffer at 37°C.

Einheitendefinition:
Ein Unit entspricht der Enzymmenge, die bei 37 °C in 30 Minuten die Freisetzung von 60 pmol [3H]-Uracil aus 200 μg uracilhaltiger Doppelstrang-DNA katalysiert.

Qualitätskontrolle:
Frei von Endo- und Exonucleasen

Transport: mit Kühlakkus

Lagerung: bei -20 °C.

Haltbarkeit:  ca. 24 Monate ab Lieferdatum

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