SuperHot qPCR Mastermix RT

Der qPCR-Mastermix für "Echtzeit"-PCR ohne internen Referenzfarbstoff. Empfohlen für "schwierige" Templates

Kat.-Nr:	Beschreibung	Menge	Preis €	Shop
S240	qPCR Master mix RT (2x1,25 ml)	100 rcs / 50µl	89.00	add

qPCR SuperHot Master Mix RT: Datenblatt
qPCR SuperHot Master Mix RT: English description

Features:
- Ausgewogenes Puffersystem für Spezifität und Sensitivität
- Schnelles, reproduzierbares Arbeiten, da alle Komponenten aufeinander abgestimmt sind
- hohe Konsistenz der Ergebnisse
- optimiert für einen großen Bereich von DNA-Templates
- Aktivierungszeit < 3 Minuten

Anwendungen:
- Realtime "Echtzeit" PCR und quantitative PCR mit Sybr green, Eva green oder spezifischen Sonden
- "High-throughput" PCR
- Multiplex PCR
- "Low copy target" PCR
- schwierige PCR-Templates, bei der andere PCR-Mixe ungenügende Ergebnisse liefern

Beschreibung:
Der Mastermix enthält alle Bestandteile ("hot-start" Polymerase, dNTP's, Reaktionspuffer), die für eine erfolgreiche PCR benötigt werden. Die herausragenden Ergebnisse bei Spezifität und Sensitivität werden durch eine hochaktive Polymerase (m-SuperHot Taq DNA Polymerase) gewährleistet, deren Aktivität bei Raumtemperatur unterdrückt ist. Das Puffersystem mit Enhancern unterstützt diese Eigenschaft. Unspezifische Produkte werden dadurch vermieden. Die MgCl₂ (8 mM, 2X) Konzentration ist optimiert für die TaqMan PCR Methode.

Konzentration: Der Mastermix ist 2-fach konzentriert

Komponenten: SuperHot Mastermix RT
Hot-Start Polymerase für qPCR, dATP, dCTP, dGTP, dTTP, Reaktionspuffer mit Stabilisatoren und Enhancern, destilliertes Wasser für die PCR, MgCl₂ für OptimierungenQualitätskontrolle:
- Frei von Endo- und Exonukleasen
- DNA Templates Tests: Lambda DNA: 12 kb-Fragment; humaner Plazenta DNA: 3 kb-Fragment
- Real time PCR Test mit SmartCycler II

Transport: mit Kühlakkus

Lagerung: bei 4°C für ca. 3 Monate, bei - 20°C für mehr als 12 Monate

Anwendung:

Komponenten	Volumen pro Reaktion	Fin. Konz.
2X qPCR / RTD-PCR Master Mix RT	25 µl	1x
Up-stream primer (10µM Lösung)	1,5 µl (range: 0,5-2.5 µl)	300 nM
Down-stream primer (10µM Lösung)	1,5 µl (range: 0.5-2,5 µl	300 nM
Referenzfarbstoff (optional)	x µl	NA
Template DNA	5 µl (0.1-15 ng/ml Plasmid DNA) (1-10µg/ml genomische DNA)	< 500ng DNA
Steriles dest. Wasser (im Kit)	bis 50 µl

Hinweis:
- Alle Komponenten vor dem Ansatz vortexen
- Reaktionsgemisch auf Eis ansetzen
- Das Enzym nach der Template-DNA zusetzen
- Möglicherweise ist es erforderlich die MgCl₂-Konzentration zu optimieren

Standard Cyler-Protokoll:

Schritt	Zeit	Temperatur
Erste Denaturierung	1-3 min	94-95°C
25-40 Zyklen: Denaturierung Annealing Extension	Sekunden 10-25 10-25 60	94-95°C 45-70°C 68-72°C per 1kb
Schluss-Extension	30 / 500 bp	68-72°C

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