qPCR/realtime PCR Mastermix DLP3

Mastermix für die "Echtzeit"-PCR mit ROX (500nM) und dUTP

Kat.-Nr:	Beschreibung	Menge	Preis €	Shop
S210	qPCR Master mix DLP3 (2x1,25ml)	100 rcs / 50µl	105.00	add

qPCR Mastermix DLP3: Datenblatt
qPCR Mastermix DLP3: English description

Features:
- Der "Echtzeit"-PCR Mastermix ist geeignet für alle block-basierten Cycler-Systeme
- der Mastermix für die Real-Time PCR enthält dUTP statt dTTP
- der Mix enthält ROX (500nM) als Referenzfarbstoff
- der Mastermix ist durch sein einzigartiges Puffersystem optimiert für Spezifität und Sensitivität
- er ist gebrauchsfertig gemischt und wird ready-to-use geliefert

Anwendung:
- Detektion und Quantifizierung von DNA und cDNA
- Gen-Expression profiling
- "Viral load"-Bestimmung
- Real-time PCR mit Block-Cyclern

Beschreibung:
Der Mastermix ist eine fertige Mischung aller Komponenten für eine erfolgreiche Realtime PCR. Nur Template-DNA und Primer werden zugegeben. Hohe Spezifität und Sensitivität werden durch eine hochaktive Hot-Start Polymerase und einen optimierten Puffersystem gewährleistet. Herausragend ist die kurze Deaktivierungszeit der Polymerase beim ersten Denaturierungsschritt. Es werden unspezifische PCR-Produkte vermieden. Anstatt dTTP wird dUTP verwendet, das bei der Behandlung mit UNG (Uracil-N-Glycosylase) Kreuzkontaminationen vorangegangener PCR-Ansätze verhindert. Im Mix sind bereits 500 nM ROX enthalten.

Konzentration: Der Mastermix ist 2-fach konzentriert

Kitbestandteile:
Hot-Start Polymerase für qPCR, dNTPs, ROX, Reaktionspuffer mit KCl und MgCl₂, Stabilisatoren und Enhancer, "PCR-grade" Wasser

Transport: mit Kühlakkus

Lagerung: bei +4°C für 3 Monate; bei -20°C für mehr als 12 Monate. Vor Licht schützen!

Anwendung:

Komponenten Volumen Fin. Konz.

2X qPCR / RTD-PCR Master mix DLP3 25 µl 1x

Up-stream primer (10 µM stock) 1,5 µl (Bereich 0,5-2.5 µl) 300 nM

Down-stream primer (10µM stock) 1,5 µl (Bereich 0.5-2,5 µl 300 nM

Template DNA 5 µl
(0.1-15 ng/ml Plasmid DNA)
(1-10 µg/ml genomische DNA) < 500ng DNA

Steril dest. Water (ist beinhaltet) bis 50 µl

Hinweis:
- Alle Komponenten vor dem Ansatz vortexen/gut mischen
- Reaktionsgemisch auf Eis ansetzen
- Möglicherweise ist es erforderlich die MgCl₂-Konzentration zu optimieren

Standard Cyler-Protokoll:

Schritt	Zeit	Temperatur
Erste Denaturierung	1-3 Min	94-95°C
25-40 Zyklen: Denaturierung Annealing Extension	Sekunden 10-25 10-25 60	94-95°C 45-70°C 68-72°C per 1kb
Schluss-Extension	30 / 500 bp	68-72°C

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