Kat.-Nr.	Beschreibung	Menge	Preis €	Shop
S121	Pfu/Psp 2X-preMix DNA Polymerase	2 x 50 rcs	79.00	add
S122	Pfu/Psp 2X-preMix DNA Polymerase	10 x 50 rcs	369.00	add

Pfu/Psp 2X-preMix: Anfrage/Bestellung per E-mail
Pfu/Psp 2X-preMix DNA Polymerase: Datasheet
Pfu/Psp 2X-preMix DNA Polymerase: English description                           

Features:
Verringerung der Kontaminationsgefahr und Pipettierfehler durch den fertigen Mix. Verbesserung der Reproduzierbarkeit, da alle Komponenten (Polymerase, dNTP's und Reaktionspuffer bereits in einen optimierten Mastermix vorliegen.
Pfu/Psp-DNA-Polymerase ist eine hochprozessive 5'→3'- DNA-Polymerase mit einer zusätzlichen 3'→5'-Exonuklease-Aktivität (proofreading). Eine 5'→3'-Exonuklease-Aktivität ist nicht vorhanden. Pfu/Psp-DNA-Polymerase ist besonders hoch aufgereinigt. Im Vergleich zu anderen Polymerasen ist das Enzyme thermostabiler und hat eine ca. 10-fach höhere Genauigkeit gegenüber der Taq DNA Polymerase. Die PCR Produkte sind "blunt-end".

Anwendungen:
- "blunt end" PCR Klonierung
- "High-fidelity" PCR
- Primer-Extension Reaktion

Konzentration: 2X konzentriert

Einheitendefinition:
Eine Unit ist die Enzymmenge, die benötigt wird, um 10 nmol dNTP in 30 min bei 75 °C in säureunlösliche Substanz zu überführen.

Komponenten:
Pfu rekombinant, 0,120 mM KCl, 32 mM (NH₄)₂SO₄, 4 mM MgSO₄, dNTPs, 40 mM Tris-HCl, pH8.8, 0.2% Triton X-100, 0.2 mg/ml BSA,

Qualitätstests: 
- DNA Amplifikation bis 2,2 kb Lambda DNA
- Verunreinigung mit bakterieller DNA, frei von Endonukleasen
- Reinheit SDS-Page > 90 %

Anwendung  

Komponenten	Volumen/Reaktion	Endkonz.
Up-stream primer (z.B. 20 µM)	0,5 µl	0.1-1.0 µM
Down-stream primer (z.B. 20 µM)	0.5 µl	0.1-1.0 µM
Template DNA (10 ng/µl)	1.0 µl	<= 0,5 µg
Pfu/Psp 2X-preMix	25 µl	2,5 units
Sterile dest. Wasser (PCR-Grade)	up to 50 µl

Hinweis: 
- Alle Komponenten vor dem Ansatz vortexen
- Reaktionsgemisch auf Eis ansetzen
- Das Enzym nach der Template-DNA zusetzen

Allgemeines Cycler-Protokoll:

Schritt	Zeit	Temperatur
Erste Denaturierung	1-3 min	95°C
25-35 Zyklen:  Denaturation  Annealing  Extension	30-100 sec  30-65 sec  1-2 min  (per 1kb)	95°C  37-69°C  72-75°C
Finale Extension	5 min	72-75°C

Lagerung: bei  -20°C für 24 Monate

Transport: mit Kühlakkus

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