DFS-PLUS Taq DNA Polymerase (DNA-frei)

Die verbesserte DFS Taq Polymerase: höhere Sensitivität und robuster gegenüber Inhibitoren durch neue Additive

 Kat.-Nr.  Beschreibung  Menge  Preis € Shop
 N140   Maximo DFS-Plus Taq Polymerase          500 units      75.00
     49.00 *
 add
 N142   Maximo DFS-Plus Taq Polymerase      5x500 units    289.00 
   229.00 *
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 N144   Maximo DFS-Plus Taq Polymerase    20x500 units    729.00
   599.00 *
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* = limitierter Einführungspreis

DFS-Plus Taq Polymerase: Anfrage/Bestellung per E-mail:
DFS-Plus Taq DNA Polymerase: Datenblatt
DFS-Plus Taq DNA Polyerase: English Description

Features:
Durch die Optimierung der bewährten DFS-Taq DNA Polymerase mit neuen Reaktionspuffer und speziellen Additiven entstand eine Polymerase, die nicht nur frei von bakterieller DNA ist, sondern auch sehr robust gegenüber PCR-Inhibitoren reagiert (Biomolekülen wie Polysacchariden, Fette und Proteine). Gesteigerte Performance des Enzyms sichert überlegene Sensitivität und zuverlässige Amplifikation. 

Beschreibung:
Die Polymerase repliziert DNA bei 72°C. Sie katalysiert die Polymerisation von Nukleotiden zu Doppelstrang-DNA in 5´-->3´ Richtung und besitzt 5´-->3´ Exonuklease-Aktivität.

Anwendungsbereich:
Anstelle von konventionell gereinigter Taq-DNA-Polymerase für sensitive PCR Untersuchungen, Nachweise von Bakterien-DNA oder wenn Biomoleküle die PCR inhibieren.

Konzentration:
5 units/μl gelöst in 10 mM KPO4 (pH 7.4 bei 25 °C), 0.1 mM EDTA, 0.1%, Tween 20, 0.1 % Triton X-100 und 50 % (v/v) Glycerin.

Unitdefinition:
Ein Unit ist die Enzymmenge, die bei 74 °C in 30 min 10 nmol Desoxyribonukleotide in TCA-fällbares, säureunlösliches Material umwandelt

Qualitätskontrollen:
Endonukleasen:
- Eine Inkubation von 20 Units des Enzyms in 50 μl 1x Reaktionspuffer mit 1 μg Lambda
  DNA für 16 h bei 65 °C ergibt keinen nachweisbaren DNA-Abbau.
- Eine Inkubation von 20 Units des Enzyms in 50 μl 1x Reaktionspuffer mit 1 μg Lambda EcoR I/Hind III-
  Fragmenten für 16 h bei 65 °C führt zu keinem nachweisbaren Abbau der DNA.
- Eine Inkubation von 32 Units des Enzyms in 50 μl 1x Reaktionspuffer mit 1 μg supercoiled pUC18 DNA für 
  16 h bei 70 °C resultiert in keiner Entwindung der DNA.
Priming-Aktivität:
 -
Eine Inkubation von 40 Units des Enzyms in 100 μl 1x Reaktionspuffer mit 100 ng Template-DNA und je
   0.2 mM dNTPs führt ohne Primer zu keiner DNA-Synthese.
PCR-Test:
-  Gute DNA-Amplifikationen wurden bei Verwendung von Lambda-DNA (amplifiziertes
    Fragment 12 kb) und humaner Plazenta-DNA (amplifiziertes Fragment 3.0 kb) als Templates erreicht.
DNA-Gehalt
- Frei von Kontaminationen mit enterobakterieller DNA.

Reaktionspuffer:
DFS-Plus Taq DNA Polymerase wird mit zwei Ammoniumsulfat Puffern und MgCl2 (100mM) geliefert.
Lagerung:
Um das Wachstum von Bakterien zu verhindern, die während der Verwendung in die Lösungen eingebracht werden können, wird eine Lagerung bei –20 °C empfohlen.

Transport: Mit Kühlakkus

 Komponenten  Volumen pro Reaktion
 10X Reaktionspuffer  5 µl
 100 mM MgCl2  optional
 dNTP-Mix (40mM)  1.0 µl
 Up-stream Primer (10 µM stock)  0,5-2.5 µl
 Down-stream Primer (10µM stock)   0.5-2,5 µl
 Template DNA  0.1-15 ng/ml Plasmid DNA
 1-10 µg/ml genomische DNA
 DFS-Plus Taq DNA Pol. (5 u/µl)   0.1 - 0.8 µl  
 Steriles dest. Water (PCR-Grade)  bis  50 µl Reaktionsvolumen

Hinweis: 
- Alle Komponenten vor dem Ansatz vortexen
- Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur ansetzen
- Das Enzym nach der Template-DNA zusetzen
- Möglicherweise ist es erforderlich die MgCl2 zu optimieren

Standard-PCR-Protokoll:

 Schritt  Zeit  Temperatur
 Erste Denaturierung  ca. 5 min  94-95°C
 
25-30 Zyklen:
 Denaturierung
 Annealing
 Extension
 
 10-25 sec
 10-25 sec
 60 sec

 94-95°C
 55-65°C
 72°C pro 1kb
 
 Schluss-Extension    5 min  72°C

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