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A600	Bst DNA Polymerase	2000 units	75.00	add
A610	Bst DNA Polymerase	10000 units	299.00	add

Bst DNA Polymerase: Englisch description

Features:
- ideal für die DNA Synthese bei der Einzelstrang-DNA ersetzt wird
- breites Puffer- und Reaktionsspektrum
- keine Exonuclease-Aktivität

Beschreibung:
Bst DNA Polymerase (Exonuklease MINUS) ist eine DNA Polymerase aus Bacillus stearothermophilus ("large fragment"). Bst DNA Polymerase polymerisiert Duplex-DNA in 5’-3’ Richtung und hat keine Exonuclease-Aktivität in 3’ – 5’ Richtung. Das Enzyme besitzt eine RT-Aktivität bei erhöhten Temperaturen.

Definition:
Eine Einheit ist die Menge des Enzyms, das erforderlich ist, um 10 nmol Deoxyribonukleotide in 30 Minuten bei 60°C in die säureunlösliche Form zu überführen. (20 mM Tris-HCl pH 8.8, 10 mM (NH₄)₂SO₄, 10 mM KCl, 2 mM MgSO₄, 0.1% Triton X-100, 30 nM M13mp18 ssDNA, 70 nM M13 sequencing primer(-47) 24-mer, 200 µM dGTP, dATP, dTTP, dCTP (a mix of unlabeled and [³³P]dCTP), 0.1 mg/ml BSA.


Konzentration: bis zu 8 U/µl

Reaktionspuffer 10X:
200 mM Tris-HC1 (pH8.8), 100 mM (NH₄)₂SO₄, 100 mM KCl, 20 mM MgSO₄, and 1.0 % Triton X-100

Inaktivierung: bei 80 °C für 20 Minuten

Qualitätskontrolle:
Endonuclease Activity: Incubation of 8 units and 50 units of enzyme with 1µg of supercoiled pBR322 DNA for 16 hours at 37° and 65°C resulted in no detectable conversion to relaxed or linear forms by agarose gel electrophoresis.

Exonuclease Activity: Incubation of 8 units and 50 units of enzyme with 1µg of HIND III-cut lambda DNA for 16 hours at 37° and 65°C resulted in no smearing of bands on agarose gels. Single stranded and double stranded exonuclease activites were tested by incubating 10 µl of enzyme with radiolabeled DNA substrate for one hour at 37° and 65°C, resulting in less than 0.1% release of TCA-soluble counts.

Purity: >99% by SDS PAGE. No detectable DNA contamination. 10 µl of the enzyme was tested for E.coli genomic DNA contamination by PCR amplifying with the E.coli 16S ribosomal primers.

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